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人腫瘤壞死因子α相關分析簡單了解一下
更新時間:2020-11-24 點擊次數(shù):1093次
人腫瘤壞死因子α是一種致炎性細胞因子,主要由單核細胞、巨噬細胞及胸腺依賴淋巴細胞(簡稱T細胞)產生,通過與其受體結合,在免疫反應調節(jié)、T細胞介導的組織損傷、慢性炎癥的發(fā)生發(fā)展等方面產生重要作用。TNF-α抑制劑主要通過阻斷TNF-α與其受體結合,從而阻止相關疾病的發(fā)生。
使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,3000轉離心30分鐘取上清,將組織加入適量生理鹽水搗碎。人腫瘤壞死因子α保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用,實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封保存。濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白,按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,zui終結果乘以5才是樣本實際濃度。
加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。分子的大小由分子量來體現(xiàn),小分子量容易穿透結構致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進入結構稀松的、滲透性高的組織。