人抗平滑肌抗體ELISA試劑盒樣本處理及要求說明
更新時間:2019-12-23 點擊次數(shù):863次
人抗平滑肌抗體(ASMA)是以機體平滑肌組織為抗原的一種自身抗體,無器官及種屬特異性,主要為IgG和IgM類型。鼠肝、腎、人甲狀腺和血小板等組織與平滑肌的肌動球蛋白具有共同的抗原性。因此用純化的肌漿球蛋白為抗原可進行沉淀試驗、間接血凝試驗、放射免疫測定和酶免疫技術(shù)檢測SMA。但目前zui常用的是以平滑肌為抗原片的間接免疫熒光法。
人抗平滑肌抗體(ASMA)是抗肌動球蛋白的自身抗體。一般采用IFA法,以大鼠胃作為抗原基質(zhì),陽性可見胃壁平滑肌呈現(xiàn)亮綠色熒光。ASMA是自身免疫性肝炎的血清學標志抗體醫(yī)學教育|網(wǎng)搜集整理。在其他肝病例如肝外膽汁淤滯、藥物誘發(fā)性肝病、急性病毒性肝炎以及肝癌患者中檢出率很低。其他疾病如傳染性單核細胞增多癥、SS、RA、支原體肺炎、腫瘤和病毒感染者也有不同程度的陽性率。正常人中僅有2%陽性。
人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1.血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。