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單克隆抗體反應的特點及影響因素是什么
更新時間:2023-03-02 點擊次數(shù):546次
單克隆抗體反應是指抗原與相應抗體之間所發(fā)生的特異性結合反應。這種反應既可在機體內(nèi)進行,也可以在機體外進行。反應的過程是經(jīng)過一系列的化學和物理變化,包括抗原抗體特異性結合和非特異性促凝聚兩個階段,以及由親水膠體轉(zhuǎn)為疏水膠體的變化。
單克隆抗體反應的特點主要有三性:即特異性、比例性、可逆性。
1、特異性是單克隆抗體反應的最主要特征,這種特異性是由抗原決定簇和抗體分子的超變區(qū)之間空間結構的互補性確定的。這種高度的特異性在傳染病的診斷與防治方面得到有效的應用。隨著免疫學技術的發(fā)展進步,還將在醫(yī)學和生物學領域得到更加深入和廣泛的應用,比如腫瘤的診斷和特異性治療等。
2、比例性是指抗原與抗體發(fā)生可見反應需遵循一定的量比關系,只有當二者濃度比例適當時才出現(xiàn)可見反應,在單克隆抗體比例相當或抗原稍過剩的情況下,反應最徹di,形成的免疫復合物沉淀最多、最大。而當抗原抗體比例超過此范圍時,反應速度和沉淀物量都會迅速降低甚至不出現(xiàn)反應。
3、可逆性是指抗原抗體結合形成復合物后,在一定條件下又可解離恢復為抗原與抗體的特性。由于反應是分子表面的非共價鍵結合,所形成的復合物并不牢固,可以隨時解離,解離后的抗原抗體仍保持原來的理化特征和生物學活性。
影響反應的兩大因素:
抗原與抗體發(fā)生特異性結合后,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質(zhì)參加,仍不出現(xiàn)可見反應。為了促使沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%氯化鈉或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。由于氯化鈉在水溶液中解離成Na+和C1-,可分別中和膠體粒子上的電荷,使膠體粒子的電勢下降。當電勢降至臨界電勢(12~15mV)以下時,則能促使單克隆抗體復合物從溶液中析出,形成可見的沉淀物或凝集物。
1、溫度
在一定范圍內(nèi),溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機會增多,使反應加速。但若溫度高于56℃時,可導致已結合的再解離,甚至變性或破壞;在40℃時,結合速度慢,但結合牢固,更易于觀察。常用的反應溫度為37℃。每種試驗都有其*的*適反應溫度,例如冷凝集素在4左右與紅細胞結合,20℃以上反而解離。此外,適當振蕩也可促進分子的接觸,加速反應。
2、酸堿度
抗原抗體反應在合適的pH環(huán)境中進行。蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì),因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點。單克隆抗體反應一般在pH為6~8進行。PH過高或過低都將影響抗原與抗體的理化性質(zhì),例如pH達到或接近抗原的等電點時,即使無相應抗體存在,也會引起顆粒性抗原非特異性的凝集,造成假陽性反應。